Co znamená setí a dosévání?

8.1. Technika pro výsev a izolaci čistých kultur mikroorganismů

Materiál dodaný do laboratoře je tentýž den podroben bakteriologickému vyšetření. Technika setí závisí na povaze inokulovaného materiálu, konzistenci živného média a účelu studie.

K provedení očkování potřebujete: studovaný materiál, živná média, bakteriologickou smyčku, špachtle (skleněné, kovové), Pasteurovy a odměrné pipety, kovové kyvety nebo tác na přenos naočkovaných kelímků a kovové krabičky na přenos zkumavek, kbelík popř. nádrž s víky pro odhození infikovaného odpadu, lihový nebo plynový hořák.

Tekutý materiál pro očkování se odebírá smyčkou nebo pipetou. Při odběru smyčkou by kapalina měla tvořit tenký průhledný film v prstenci smyčky – „zrcadlo“. Pipety se používají, když je materiál naočkován ve velkém nebo přesně odměřeném objemu.

Způsob odběru hutného materiálu je dán jeho konzistencí. Při výsevu se nejčastěji používá bakteriologická klička.

Veškeré manipulace spojené s výsevem a izolací mikrobiálních kultur se provádějí nad plamenem hořáku. Bakteriální smyčka se před odběrem materiálu kalcinuje v plameni hořáku, poté se ochladí tak, aby při kontaktu s kapalným médiem nezpůsobila var kapaliny a dotyk s agarem nebyl doprovázen jeho roztavením . K ochlazení smyčky je nejlepší ponořit ji do kondenzační kapaliny zkumavky se sterilním živným médiem nebo se sterilním médiem dotknout víčka Petriho misky. Smyčku nemůžete ochladit dotykem povrchu živného média, i když je bez mikrobiálního růstu, protože může obsahovat kolonie, které nejsou viditelné pouhým okem.

Po dokončení výsevu se smyčka znovu spálí, aby se zničila mikrobiální kultura v ní nebo materiál infikovaný mikroorganismy.

Pipety a špachtle používané k očkování se ponoří do dezinfekčního roztoku.

Po naočkování se na spodní stranu Petriho misek napíše název naočkovaného materiálu a do horní třetiny se na zkumavky napíše název naočkovaného materiálu, případně se uvede číslo rozboru a datum naočkování.

8.1.1. Technika setí na pevné a tekuté živné půdy

• Při setí do tekutého živného média se smyčka s materiálem ponoří do média. Pokud je materiál viskózní a nelze jej ze smyčky odstranit, rozetře se o stěnu nádoby a poté se smyje kapalným médiem. Kapalný materiál shromážděný v Pasteurově nebo odměrné pipetě se nalije do živného média.
• Při očkování na šikmý agar s masovým extraktem se zkumavka odebere do levé ruky mezi prsty I a II tak, aby základna zkumavky byla na povrchu ruky a očkování se provádí pod kontrolou očí. Odstraňte zátku ze zkumavky pravou rukou pomocí prstů IV a V, aniž byste se dotkli části, která jde dovnitř zkumavky. Zbývající tři prsty pravé ruky zůstávají volné k nabrání bakteriologické kličky, přes kterou se provádí očkování. Smyčka se drží jako pero. Po odstranění zátky se zkumavka s živnou půdou udržuje v nakloněné poloze, aby se do ní nedostaly cizí mikroorganismy ze vzduchu.

Při inokulaci na šikmý agar se smyčka se subkultivovaným materiálem vloží do zkumavky až ke dnu, spustí se naplocho na povrch živného média a tahy se aplikují klouzavými pohyby zdola nahoru od jedné stěny testu. trubkou do druhé (obr. 8.1).

• • Při výsevu na povrch hustého živného média ze zkumavky do Petriho misky se zkumavka fixuje prsty levé ruky II, III a V a víko Petriho misky se mírně pootevře I a IV prsty levé ruky tak, aby smyčka nebo špachtle mohla volně procházet do vzniklé mezery (obr. 8.2). Malé množství testovaného materiálu odebraného ze zkumavky pomocí bakteriologické kličky se vtírá do povrchu živného média na okraji misky. Smyčka je poté spálena, aby se zničil veškerý přebytečný materiál na ní. Secí linka začíná od místa, kde se nachází materiál. Bakteriologická smyčka je umístěna naplocho na živné médium, aby nedošlo k poškrábání jeho povrchu, a tahy se provádějí přes celé médium nebo v sektorech, přičemž se nejprve natáhne dno kalíšku (za předpokladu, že médium je průhledné) do 4, 8 nebo 16 stejných dílů. Měli byste se snažit zajistit, aby tahy aplikované smyčkou byly umístěny co nejblíže k sobě, protože to prodlužuje celkovou linii setí a umožňuje získat izolované kolonie mikrobů na její koncové části.
• • Pro rovnoměrné rozložení naočkovaného materiálu po povrchu hustého živného média můžete místo smyčky použít tampon nebo špachtli.

Když je v naočkovaném materiálu dostatek mikrobů, rostou ve formě filmu pokrývajícího celý povrch živného média. Tento typ mikrobiálního růstu se nazývá kontinuální nebo trávníkový růst. Výsev trávníku se provádí, když potřebujete získat velké množství mikrobiální kultury jednoho typu.

• Pro naočkování materiálu do tloušťky hustého živného média připravte suspenzi ve sterilní vodě z vodovodu nebo v izotonickém roztoku. Do pipety naberte 0,1–1 ml suspenze (v závislosti na stupni podezření na mikrobiální kontaminaci) a nalijte do prázdné sterilní Petriho misky. Poté se kelímek naplní 15–20 ml maso-peptonového agaru, rozpustí se a ochladí na teplotu 40–45 °C (při této teplotě by zkumavka s médiem naneseným na tvář neměla způsobit pálení senzace). Pro zajištění rovnoměrného rozložení testovaného materiálu v živném médiu se uzavřený kelímek s obsahem mírně pootočí nad povrch stolu.
• Výsev injekcí do sloupce živného média se provádí ve zkumavce s médiem zmrazeným ve formě sloupce. Zkumavka se vezme jako obvykle do levé ruky a smyčka s materiálem se přilepí do středu sloupce na dno zkumavky.
• Pomocí kalibrované bakteriologické kličky (průměr 2 mm, objem 0,005 ml) se moč naočkuje do sektoru A Petriho misky s obyčejným agarem, čímž se vytvoří asi 40 proužků. Poté se smyčka vypálí a provedou se 4 řádkové výsevy ze sektoru A do sektoru I, ze sektoru I do sektoru II a ze sektoru II do sektoru III, vždy po vypálení smyčky (obr. 8.3).

Misky se inkubují při teplotě 37 °C po dobu 18–24 hodin, poté se spočítá počet kolonií vyrostlých v různých sektorech a počet bakterií v 1,0 ml se stanoví podle tabulky níže. 8.1 (tato metoda je akceptována pro stanovení stupně bakteriurie).

Tabulka 8.1. Stanovení počtu bakterií v 1 ml sektorovou inokulační metodou*

Počet kolonií v sektorech

Počet bakterií v 1 ml

*Nařízení č. 535 z 22. dubna 1985 „O sjednocení mikrobiologických (bakteriologických) výzkumných metod používaných v klinických diagnostických laboratořích zdravotnických zařízení“ (Moskva, 1985).

8.1.2. Metody izolace čistých kultur

Čistá kultura se obvykle nazývá soubor homogenních mikroorganismů patřících ke stejnému druhu, získaných z hmoty jedné kolonie, jejíž buňky jsou identické v morfologických, barvicích, kulturních, metabolických a genetických vlastnostech, protože podle existujících koncepcí je mikrobiální kolonie je populace bakteriálních buněk, která vznikla jako výsledek reprodukce jedné mateřské buňky. Mikrobiální kolonie je analogem klonu.

Čisté kultury mikroorganismů stejného druhu, izolované z různých zdrojů, se mohou navzájem lišit mírnými odchylkami v morfologických, kulturních nebo biochemických charakteristikách, aniž by překračovaly hranice svého druhu nebo poddruhu. Takové kultury se nazývají kmeny. Místo dříve pojmenovaných typů se v závislosti na povaze změněné charakteristiky označují tyto morfovary (různé morfologické vlastnosti), sérovary (s antigenními rozdíly), biovary (liší se biologickými vlastnostmi).

Čistá kultura je nezbytná pro studium morfologických, kulturních, biochemických a antigenních vlastností, jejichž souhrn určuje druh zkoumaného mikroorganismu.

Bylo navrženo mnoho různých metod pro izolaci čistých kultur mikrobů z materiálů obsahujících hojnou smíšenou mikroflóru. Nejpoužívanější metodou je mechanická separace mikroorganismů nacházejících se ve zkoumaném materiálu za účelem získání izolovaných kolonií na povrchu nebo v hloubce živného média. Selektivní živná média se široce používají ke stimulaci rozvoje těch mikroorganismů, jejichž čistá kultura má být izolována. Některé typy mikrobů jsou vysoce citlivé na určité faktory prostředí. Individuální rezistence mikrobů vůči jednomu nebo druhému faktoru byla použita k vývoji metod pro izolaci čistých kultur zabíjením doprovodné mikroflóry. Touto metodou dochází k izolaci sporových forem mikrobů, které jsou odolné vůči vysokým teplotám, mykobakterií tuberkulózy, které jsou na rozdíl od jiných mikrobů obsažených ve sputu lhostejné k působení koncentrovaných roztoků minerálních kyselin.

Při izolaci čisté kultury patogenních mikrobů z patologického materiálu kontaminovaného cizí mikroflórou se někdy uchýlí k infekci laboratorních zvířat, která jsou vnímavá k typu mikroba, který má být izolován ze studovaného materiálu. Biologická metoda izolace čisté kultury se používá k vyšetření sputa na obsah pneumokoků a mycobacterium tuberculosis.

Získání čisté kultury proséváním do hloubky média (podle Kocha). Tři zkumavky obsahující 15 ml masového peptonového agaru se umístí do vodní lázně, aby se agar roztavil. Roztavené médium se ochladí na teplotu 43–45 °C. Jedna bakteriologická smyčka testovaného materiálu se umístí do zkumavky. Pro lepší promísení materiálu s médiem několikrát otáčejte naočkovanou zkumavkou a držte ji mezi dlaněmi. Poté se jedna smyčka (kalcinovaná a ochlazená) obsahu 1. zkumavky přenese do 2. a stejným způsobem z 2. do 3. zkumavky. Připravená ředění mikrobů se nalije ze zkumavek do sterilních Petriho misek, označených čísly odpovídajícími číslům zkumavek.

Po zgelovatění média s testovaným materiálem se kalíšky umístí do termostatu. Počet kolonií na plotnách s kultivačním médiem klesá, jak se materiál ředí.

Izolace čisté kultury metodou Drigalski. Roztavené živné médium se nalije do tří Petriho misek. Zmrazené médium musí být vysušeno, protože jeho vlhký povrch podporuje tvorbu souvislého růstu. Jedna kapka testovaného materiálu se přidá do prvního šálku a vetře se sterilní špachtlí do povrchu živného média. Poté, aniž by došlo k propálení špachtle nebo sbírání nového materiálu, se špachtle přemístí do 2. a poté 3. šálku, přičemž se zbývající materiál vtírá do povrchu živného média.

Metoda povrchového prosévání navržená Drigalskym je nejběžněji používanou metodou pro získání čisté kultury mikrobů. Místo špachtle můžete použít smyčku. Materiál na živném médiu je distribuován paralelními tahy po celém pohárku v jednom směru. Potom otočením kalíšku o 90° jsou provedeny tahy ve směru kolmém na první tahy. Při tomto způsobu výsevu se materiál ve smyčce spotřebovává postupně a izolované kolonie mikrobů rostou podél linií tahů aplikovaných na konci výsevu.

Pěstování a izolace čistých kultur anaerobů. Pro pěstování anaerobů je nutné vytvořit určité podmínky, jejichž podstatou je odstranění molekulárního kyslíku ze živného média a prostoru obklopujícího tyto kultury. Další povinnou podmínkou pro zajištění izolace anaerobů z testovaného materiálu je zavedení velkého množství inokula do živného média.

Jediný rozdíl mezi živnými médii používanými pro pěstování anaerobů je jejich nižší obsah volného kyslíku. Nejjednodušší způsob odstranění­Redukce rozpuštěného kyslíku je varem. Bezprostředně před naočkováním materiálu se zkumavky se živnými médii vaří ve vodní lázni po dobu 10–20 minut. Při varu se z média vytěsní vzduch a tím se odstraní kyslík. Čerstvě uvařená živná půda se rychle zchladí ponořením do ledu nebo pod tekoucí studenou vodou, aby nedošlo k jejímu nasycení kyslíkem, a používá se k setí. Aby se snížila difúze kyslíku ze vzduchu, živná média se nalijí na povrch sterilní vazelínou nebo parafínovým olejem (tloušťka vrstvy 1–1,5 cm). Naočkování média se provádí pipetou přes olej v nakloněné poloze zkumavky.

Jako redukční látky se používají glukóza, kyselina askorbová, cystein, glykol a glutathion. Živočišné tkáně parenchymatických orgánů se aktivně vážou na kyslík. Příprava živného média Kitta-Tarozzi (recept 161), široce používaného pro pěstování anaerobů, je založena na této vlastnosti živočišných buněk. Někdy jsou do tekutých živných médií umístěny porézní látky: vata, pemza, které na svém povrchu adsorbují vzduchové bubliny.

K vytvoření bezkyslíkatých podmínek se využívají fyzikální, chemické a biologické faktory.

Fyzikální metody kultivace anaerobů:

• • Vignal-Veyonova metoda. Odebereme 4–5 zkumavek s 0,5% cukerným agarem, rozpustíme a ochladíme na teplotu 40–45 °C. Malé množství testovaného materiálu se napipetuje do obsahu jednoho z nich a důkladně se promíchá. Pro snížení koncentrace materiálu za účelem získání izolovaných kolonií se naočkované médium v ​​množství odpovídajícím objemu zavedeného materiálu přenese z 1. zkumavky do 2., z 2. do 3. zkumavky. Poté se obsah každé zkumavky naplní do kapilár tří Pasteurových pipet.

Aby živné médium při nasávání do pipet neztuhlo, dokud se jejich hrot neodlomí, ponoříme pipety na 3–5 minut do sterilní vody o teplotě 45–50 °C. Po naplnění se prodloužený konec tuby uzavře a umístí do skleněného válce s vatou na dně. Po 2–3 dnech vyrostou v agarovém sloupci jasně viditelné kolonie anaerobních mikrobů. Vyrostlé kolonie se snadno izolují. K tomu se kapilára rozřízne pilníkem nad úrovní zamýšlené kolonie, rozbije se a mikrobiální kolonie umístěná v agaru se odstraní smyčkou a znovu se zasadí do čerstvého živného média;

• • pěstování anaerobů ve vakuu. Vakuové podmínky pro pěstování anaerobů se vytvářejí v anaerostatu nebo exsikátoru. Testovaný materiál nebo mikrobiální kultura se naočkuje do zkumavek s tekutým médiem nebo do Petriho misek s hustým živným médiem. Plodiny se umístí do anaerostatu, poté se připojí k čerpadlu a vzduch se odčerpá. Stupeň zředění vzduchu je určen údaji na vakuometru. Kolonie anaerobů rostou ve vakuu na povrchu hustého živného média.

Chemické metody pěstování anaerobů (Aristovského metoda). Materiál, který má být testován na přítomnost anaerobů, se naočkuje na médium v ​​Petriho miskách a umístí do exsikátoru, na jehož dně je umístěn chemický absorbér kyslíku: hydrogensiřičitan sodný nebo pyrogalol. Poháry s plodinami jsou umístěny na stojanu v rozšířené části nádoby. Zařízení se uzavře víkem a umístí se do termostatu při teplotě 37 * C na 24–48 hodin.

Biologická metoda pěstování anaerobů (podle Fortnera). Do Petriho misky se nalije silná vrstva 5% krevního agaru s 1–2 % glukózy. Uprostřed kalíšku v živné půdě je sterilním skalpelem vyříznuta rýha široká 1–1,5 cm, která rozděluje živnou půdu na dvě poloviny. Jedna z nich je naočkována kulturou anaerobů nebo materiálem testovaným na jejich přítomnost, druhá polovina kulturou aerobů: zázračná tyčinka (Serratia marcescens) nebo E. coli (Escherichia coli). Před výsevem se kelímky suší v termostatu, aby se aeroby spolu s kapkami vlhkosti nemohly dostat na druhou stranu kelímku. Naočkované kelímky se uzavřou a volný prostor mezi dnem a víčkem se utěsní lepicí náplastí, aby se do kelímku nedostal kyslík zvenčí. V termostatu jsou šálky umístěny dnem vzhůru. Rychle rostoucí aeroby, absorbující kyslík v kalíšku, čímž vytvářejí příznivé podmínky pro růst anaerobů.

Anaerostat pro kultivaci anaerobů. Anaerostat – zařízení pro pěstování mikrobů v anaerobních podmínkách – je silnostěnná kovová nebo plastová komora s hermeticky šroubovaným víkem, na které je vakuometr a dva kohouty pro připojení k vývěvě. Místo kyslíku používá směsi plynů.

aplikace (zavedení) smyčkou, pipetou nebo jiným nástrojem materiálu obsahujícího bakterie na (c) živná média za účelem izolace čistých bakterií, jejich akumulace, skladování, jakož i stanovení množství a rozmanitosti bakterií (viz. Bakteriologická metoda). P. b. by měly být prováděny tak, aby bylo dosaženo zamýšleného cíle (například získání izolovaných kolonií) a zároveň se zabránilo kontaminaci inokula a kultivačních médií mikroby z prostředí, jakož i infekci lidí a kontaminaci okolních objektů mikroby nalezené v inokulu. P.b. prováděny ve speciálních oděvech, ve speciálních boxech a laboratořích obsahujících minimální počet mikrobů, v blízkosti plamene hořáku, se sterilními nástroji, ve sterilním prostředí a za přísného dodržování dalších aseptických podmínek. V závislosti na účelu a semenném materiálu P.b. vyrobeno na pevných nebo kapalných médiích, Petriho miskách, zkumavkách, baňkách, matracích, fermentorech atd. Technika očkování bakteriálních Petriho misek. smyčka: smyčka se kalcinuje v plameni, ochladí, odebere se kapka semene, levou rukou se mírně pootevře jeden okraj kalíšku, dovnitř se vloží smyčka, krouživými pohyby se u jednoho z okrajů vytvoří plošina smyčka a materiál se vysévá na celou plochu média v rovnoběžných tahech s intervalem 4 – 5 mm. Pokud materiál obsahuje velké množství mikrobů, pak se materiál podobně naočkuje na polovinu kalíšku, poté se smyčka vypálí, kalíšek se otočí o 90° a na zbývající část média se provedou kolmé tahy smyčkou, zachycení části předchozího očkování. Další možností výsevu se smyčkou je, že kelímek s médiem je mentálně rozdělen na 4 – 5 radiálních sektorů a stejná smyčka se používá k naočkování všech sektorů jeden po druhém. Technika setí špachtlí: vezměte 3 šálky hustého média. Kapka semenného materiálu se zavede do středu první smyčkou nebo pipetou a provádí se kontinuální výsev krouživým pohybem lopatky nebo kalíšku.Touž stěrkou, aniž bychom ji sterilizovali, se materiál rozdělí na druhou a třetí poháry. Tato technika vám umožňuje získat izolované kolonie, ale je méně ekonomická než ostatní. Technika výsevu tamponem: Nejprve pomocí tamponu, otáčením v různých směrech, nakreslete na kalíšek s médiem diagonální dráhu o šířce 1–2 cm, poté pomocí smyčkových tahů přes cestu naočkujte médium po obou jeho stranách. U druhé možnosti je jeden z radiálních sektorů kalíšku naočkován tamponem a poté, jeden po druhém, zbývající sektory jsou naočkovány smyčkou, pokaždé, když vstupují na povrch již ošetřený tamponem. Technika setí pomocí razítka replikátoru: Do jamek základny razítka replikátoru se pomocí pipety nalije 0,1 ml bujónu nebo agarových výplachů. Obal známky je umístěn na základně tak, aby se špendlíky zanořily do otvorů s řezem, načež se na povrchu hustého média jednoho nebo více pohárů vytvoří otisky (repliky). Touto technikou lze na jedné desce testovat současně 25 – 50 vzorků na citlivost na antibiotika, fermentaci cukrů nebo jiné vlastnosti. Na výtiscích se objevují oblasti růstu jednotné velikosti a tvaru. Technika setí plaku: při určování některých světců při bádání. Selekce bakterií (hemolýza, toxigenita, lecitinázová aktivita atd.) na pevném médiu vytváří hustou inokulaci na omezené ploše média ve formě obdélníku, oválu, kruhu o rozměrech 0,5 – 0,8 × 1 – 1,5 Mezi plaky by měla být zachována vzdálenost několika cm (v závislosti na testu). Technika setí souvislého trávníku: Sterilní pipetou přidejte 1 ml 1 – 2 miliardy to-ra do kelímku s médiem, opatrnými krouživými pohyby kelímku pokryjeme bez výjimky celý povrch média, kelímek mírně nakloníme a zbytek odsajeme do -ra s pipetou. Vzniklý pevný trávník se suší a používá se například k různým účelům. pro aplikaci typických fágů. Technika naočkování zkumavek šikmými: přímý výzkum osiva materiál na šikmých médiích se provádí zřídka, například při izolaci mykobakterií. Častěji se směs přenáší na šikmé médium z jiné zkumavky nebo z kolonií na miskách. K tomu se obě zkumavky drží v levé ruce (zkumavka s naočkovaným médiem je umístěna blíže k tělu laborantky) v nakloněné poloze mezi palcem a ukazováčkem tak, aby bylo možné pozorovat povrch média. Smyčka je v pravé ruce. Zátky obou zkumavek se odstraní stisknutím mezi malíčkem a dlaní (hypotenor). V této poloze zůstávají až do konce setí. Okraje zkumavek se spálí, klička se kalcinuje, ochladí o stěnu zkumavky, lehce se s ní dotkne růstu nádoru na povrchu živné půdy, klička se bez dotyku stěn přenese na druhá zkumavka a provádí se kontinuální výsev. Smyčka se kalcinuje, umístí do stojanu, okraje zkumavek se kalcinují a uzavřou zátkami. Technika setí v kondenzované vodě: Vyberte čerstvě nařezané médium obsahující na dně kapku kondenzační kapaliny. Výzkum Směs se odebere smyčkou, zátka se otevře, okraje zkumavky a smyčka se spálí a opatrně, aniž by se dotýkaly média a stěn, se přidají do kondenzační vody. Při expresi mobilních bakterií se růst bakterií z kondenzované vody šíří na vlhký povrch ostění. Z vrcholu bakteriálního růstu se druhá zkumavka naočkuje do kondenzační vody atd. Tato technika umožňuje získat čistou směs pohyblivých bakterií, například Proteus (Shukevichova metoda), původce tetanu (Fildesova metoda). Technika setí do horní části řezného média: Materiál nebo směs se při dodržení všech výše uvedených technických metod nanáší ve formě plaku na horní část čerstvě řezaného média. Trubky jsou umístěny v termostatu ve svislé poloze a je pozorováno sjíždění krusty po povrchu zkosené části, což je typické pro namožení sliznic. Technika setí v hustých vrstvách Středa:do 15-20 ml rozpuštěného a na 48°C ochlazeného hustého živného média přidejte 1 ml testu. materiál nebo výzkum to-ry (jedno nebo několik ředění v závislosti na účelu). Směs a médium se energickými krouživými pohyby lahve promíchá, nalije se do sterilního kelímku, rozloží se v rovnoměrné vrstvě po celém povrchu, nechá se ztuhnout na rovném vodorovném povrchu a vloží se do termostatu. Kolonie rostou v tloušťce a na povrchu média, a pokud je médium průhledné, lze je snadno spočítat. Stejným způsobem lze výsev provést do tloušťky sloupce hustého média ve zkumavce. Technika setí vstřikováním do sloupce hustého nebo polotekutého média: použijte vysoký sloupec hustého média, například při kultivaci anaerobů; sloupec polotekutého živného média, například při studiu sacharolytických vlastností v polotekutém médiu; poloskloněná pevná média, například při akumulaci a předběžné identifikaci izolované trávy v agaru se třemi cukry. Ve všech případech bakterii. Pomocí smyčky nebo provázku se semenným materiálem se médium propíchne od povrchu ke dnu. Doporučuje se držet zkumavku dnem vzhůru, aby nedošlo ke kontaminaci prostředí vzdušnou mikroflórou. Inokulace do tekutých médií ve zkumavkách nebo lahvičkách se obvykle provádí pomocí sterilních a Pasteurových nebo odměrných pipet. Materiál lze také naočkovat bakteriemi ve zkumavkách. smyčka.

(Zdroj: Slovník pojmů mikrobiologie)

• Mikrobiální populace
• Laboratorní sklo.